蛋白质溶液/固体鉴定
技术原理
蛋白质(protein)是有机大分子,是构成细胞的基本有机物和生命活动的主要承担者。蛋白质在催化生命体内各种反应进行、新陈代谢、抵御外来物质入侵及控制遗传信息等方面都起着至关重要的作用。蛋白质的一级结构是氨基酸序列,通过鉴定氨基酸序列来匹配它的蛋白质,这是定性研究,是蛋白质组学的基础,也是蛋白质组学的核心技术之一。
质谱一般由离子源(Ion source)、质量分析器(Mass analyzer)和离子检测器(Detector)三部分组成。传统的质谱仅用于小分子挥发物质的分析,但随着新的离子化技术的出现,如基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF)和电喷雾电离质谱(ESI-MS)等,各种质谱技术的出现为蛋白质分析提供了一种新的且准确快速的途径。现在蛋白质组学基本研究手段是:以生物质谱技术为核心,对蛋白质进行大规模、高通量分离、鉴定和分析。
蛋白质质谱鉴定的基本原理是用蛋白酶将蛋白质消化成肽段混合物,经MAILDI或ESI等软电离手段将其离子化,然后通过质量分析器将具有特定质核比的肽段离子分离开来。通过实际谱图和理论上蛋白质经过蛋白酶消化后产生的一级质谱峰图和二级质谱峰图进行的比对,进行蛋白鉴定。
蛋白质溶液/固体鉴定流程
技术特点
l 高通量、自动化程度高、分离能力强;
l 通用性强,可分析蛋白质条带、免疫共沉淀洗脱液、组织提取液、全细胞裂解液、亚细胞分离组分等多种形式的样品。
样品要求
l 双向凝胶胶点:考染、银染(质谱兼容)点清晰可见;
l SDS-PAGE胶条:考染、银染(质谱兼容)条带清晰可见,单一蛋白质,纯度>90% ;
l 蛋白质溶液:单一蛋白质,纯度>90%。
注意事项
l 为保证高质量的技术服务结果,请您参照以下说明对实验样本进行处理和保存:
l 蛋白洗脱液:定量并计算总蛋白量,真空干燥后,密封好管口,冰袋包装寄送
l 蛋白质条带(考染):从凝胶上割取条带时,避免污染,将条带放入EP管内,密封好管口,冰袋包装寄送
l 快递寄送样本运输过程中,可能晃动幅度会比较大,请做好基本运输防护措施
项目报告
l 实验步骤
l 质谱参数
l 质谱图片
l 原始数据
l 鉴定的蛋白质详细信息
蛋白质溶液/固体鉴定一站式服务
l 您只需下单-寄送样品
l 明德正康为您完成-样品处理-上机分析-数据分析-项目报告