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磷酸化修饰位点鉴定
技术原理
蛋白质磷酸化修饰是生物体内最重要的共价修饰方式之一。蛋白质的磷酸化和去磷酸化这一可逆过程调节着包括细胞增殖、发育、分化、信号转导、细胞凋亡、神经活动、肌肉收缩及肿瘤发生等过程在内的所有生命活动。在哺乳动物细胞生命周期中,大约有1/3的蛋白质发生着磷酸化修饰。蛋白质磷酸化可以发生在多种氨基酸上,其中以丝氨酸 (S) 最多、苏氨酸 (T)次之、酪氨酸 (Y) 相对较少。
技术原理:先通过IP得到目的蛋白,再通过SDS-PAGE对目的蛋白进行分离纯化,将胶条上目的蛋白对应的条带切下进行胶内酶解和高灵敏度的液质联用分析(LC-MS/MS),通过数据库检索得到蛋白上的修饰位点。

 

磷酸化修饰位点鉴定技术原理图

技术特点
l  鉴定通量高
l  应用范围广泛
 
样品要求
l  植物组织样品>200mg,动物组织样品>1g;
l  血液样品至少1ml;
l  尿液样品>2ml;
l  细胞样品>5x107个细胞;
l  酵母、微生物样品干重200mg。
 
注意事项
l  请使用足量的干冰运输,并尽量选用较快的邮递方式,以降低运输过程中样品降解的可能性。
 
项目报告
l  实验步骤
l  质谱参数
l  质谱谱图
l  鉴定的磷酸化位点详细信息
 
磷酸化修饰位点鉴定一站式服务
l  您只需下单-寄送样品
l  明德正康为您完成-样品处理-上机分析-数据分析-项目报告
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