技术原理
在通常的蛋白质相关分析中，为了破坏蛋白质的三维立体空间结构，便于酶解等操作，会通过加热或是加入高浓度的变性试剂(如尿素、盐酸胍等)，使蛋白质变性;另外，对于常用的分离手段——反相色谱来讲，其流动相的酸性pH条件与高有机相同样也会使蛋白质变性。当需要对蛋白质中的非共价结合进行研究时，为了避免非共价结合被强烈的变性条件所破坏，则需在非变性的液相-色谱条件下(通常为50mM醋酸铵，pH=7的中性体系)进行研究;另外，对于组成较为复杂的蛋白样品，在非变性条件下分析时，由于体系中质子数减少，所以蛋白电荷态数目也会相应减少，电荷态之间的相互重叠度也会下降，进而减少复杂组分之间的相互影响，从而能够得到复杂蛋白样品中每个组分的分子量信息。
目前，非变性质谱技术主要应用在两个方面：一是生物制药领域，通过打开单克隆抗体链间二硫键后在Cys位点上偶联小分子药物(Cys-ADC)的完整分子量分析，此类药物的链间仅靠非共价力结合，故变性条件下各条链会分离，无法测得其完整状态的分子量;另一应用方向为研究蛋白质多聚体，非变性条件下不仅可以保持各个亚基间的非共价相互作用，同时由于中性条件更接近生理状态，得到的结果更具意义。
我们具有先进的非变性蛋白质谱分析平台－Exactive Plus EMR质谱仪与Protein Deconvolution 3.0 软件，结合质谱仪的超高分辨率、超快扫描速度、超高质量精度、超高灵敏度以及拓展的质量范围，精准的分析，用于研究类似天然状态下保留有三级和四级结构的蛋白质和蛋白质复合物的结构学、拓扑学和构造。可用于单克隆抗体／ADCs类药物 、PEG修饰蛋白质、低聚蛋白药物、糖型和组装蛋白质的表征进行分析。同时，Exactive Plus EMR 质谱仪的全面分析性能使之成为优秀的筛查多肽和小分子的解决方案。

Orbitrap质谱平台用于非变性质谱分析

技术特点
l  ADCs药物分析，例如DAR测定
l  PEG或多糖修饰蛋白质分析
l  组装型蛋白质或蛋白复合药物研究
l  测定蛋白和蛋白复合物在天然结构状态下的分子量
l  非变性蛋白质和蛋白复合物的结构学、拓扑学研究
 
样品要求
l  双向凝胶胶点：考染、银染（质谱兼容）点清晰可见；
l  SDS-PAGE胶条：考染、银染（质谱兼容）条带清晰可见，单一蛋白质，纯度>90% ；
l  蛋白质溶液：单一蛋白质，纯度>90%。

 
注意事项

l  为保证高质量的技术服务结果，请您参照以下说明对实验样本进行处理和保存:
l  蛋白洗脱液：定量并计算总蛋白量，真空干燥后，密封好管口，冰袋包装寄送
l  蛋白质条带（考染）：从凝胶上割取条带时，避免污染，将条带放入EP管内，密封好管口，冰袋包装寄送
l  快递寄送样本运输过程中，可能晃动幅度会比较大，请做好基本运输防护措施
 
项目报告
l  实验步骤
l  质谱参数
l  质谱图片 
l  原始数据
l  鉴定的蛋白质详细信息
 
非变性质谱分析一站式服务
l  您只需下单-寄送样品
l  明德正康为您完成-样品处理-上机分析-数据分析-项目报告