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IP/Co-IP样品蛋白质鉴定
技术原理
在生物体的生命活动中,蛋白质的功能是通过蛋白质与蛋白质之间的相互作用来实现的。因此,研究新的蛋白互作可以为研究蛋白质的潜在功能提供新的方向。在诸多蛋白互作鉴定实验中,Pull-down常用于体外蛋白互作检验,以及帮助发现新的互作蛋白。Pull-down实验利用高度纯化且富集的诱饵蛋白捕获在细胞中相互作用较弱或丰度低的靶蛋白,大幅度提高发现新靶蛋白的效率。Pull-down实验的具体步骤为:表达纯化GST、polyHis或Biotin标记的诱饵蛋白,使用固定化亲和配体将诱饵蛋白与固相基质稳定结合,再将诱饵蛋白与待测细胞裂解液进行混合孵育,在这一过程中,诱饵蛋白与目标蛋白相互作用并结合在一起,通过清洗除去非特异性结合的杂蛋白,即可获得与诱饵蛋白相互作用的目标蛋白,再通过质谱分析对目标蛋白进行鉴定。

IP/Co-IP样品蛋白质鉴定流程

技术特点
l  适合中度复杂的蛋白质样品, 如相互作用的蛋白质条带和洗脱液
l  高准确性, 高灵敏度
 
样品要求
l  双向凝胶胶点:考染、银染(质谱兼容)点清晰可见;
l  SDS-PAGE胶条:考染、银染(质谱兼容)条带清晰可见,单一蛋白质,纯度>90% ;
l  蛋白质溶液:单一蛋白质,纯度>90%。
 
注意事项
l  为保证高质量的技术服务结果,请您参照以下说明对实验样本进行处理和保存:
l  蛋白洗脱液:定量并计算总蛋白量,真空干燥后,密封好管口,冰袋包装寄送
l  蛋白质条带(考染):从凝胶上割取条带时,避免污染,将条带放入EP管内,密封好管口,冰袋包装寄送
l  快递寄送样本运输过程中,可能晃动幅度会比较大,请做好基本运输防护措施
 
项目报告
l  实验步骤
l  质谱参数
l  质谱图片 
l  原始数据
l  鉴定的蛋白质详细信息
 
IP/Co-IP样品蛋白质鉴定一站式服务
l  您只需下单-寄送样品
l  明德正康为您完成-样品处理-上机分析-数据分析-项目报告

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